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篇名 大肠癌噬菌体抗体库的构建及初步鉴定
作者 南清振, 高蕾, 肖冰, 杨希山, 张振书
关键字 大肠癌;噬菌体抗体库;Fab抗体
机构 1 510515 南方医科大学南方医院消化内科; 2 510120 广州中医药大学第二附属医院影像科
基金
2008
第一期
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摘要 【摘要】 目的 构建及初步鉴定大肠癌噬菌体抗体Fab呈现库。方法 分离大肠癌患者外周血淋巴细胞,提取淋巴细胞总RNA,逆转录成cDNA。用相应引物进行PCR,扩增出轻链和重链Fd段基因,经酶切后分别和噬粒载体pComb3连接,再经电穿孔转化大肠杆菌XL1-Blue菌株,将轻链和重链Fd基因先后克隆入pComb3中。结果 从分离出的淋巴细胞中提取到高质量RNA,RT-PCR分别扩增出约680 bp大小的κ、λ和Fd基因。PCR产物和载体经纯化、双酶切后进行连接转化,成功地构建了人源性Fab